品目號3-1：（★核心產(chǎn)品）禽流感病毒通用型熒光RT-PCR試劑盒1、用途：用于檢測禽流感病毒。2、實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3、靈敏度和特異性：對于感染性雞胚尿囊液，熒光RT-PCR檢測的最高稀釋度為10-8～10-7，與雞胚病毒分離靈敏度接近。能夠檢測禽肉和組織臟器中的禽流感病毒，與雞胚病毒分離靈敏度接近。對于其余禽類疾病，相應試劑盒檢測結果應為陰性。4、產(chǎn)品配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5、操作過程及要求：（1）為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。（2）為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。（3）★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。（4）為實現(xiàn)一次檢多病種，RNA類產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。（5）※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本合同包內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。（6）反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。（7）反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6、實驗結果判定：（1）有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。（2）結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7、有效期：到用戶手上有效期應≥9個月。8、保存條件：-20℃保存。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品國家參 考實驗室出具驗證報告。10、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家參與現(xiàn)行有效國家標準制定的證明，須附生產(chǎn)廠家蓋章的國家標準；11、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。12、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品實物1個。品目號3-2：禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR試劑盒1、用途：用于檢測H5亞型禽流感病毒。2、實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3、靈敏度和特異性：對于感染性雞胚尿囊液，熒光RT-PCR檢測的最高稀釋度為10-8～10-7，與雞胚病毒分離靈敏度接近。能夠檢測禽肉和組織臟器中的H9亞型禽流感病毒，與雞胚病毒分離靈敏度接近。對于其余禽類疾病，相應試劑盒檢測結果應為陰性。4、產(chǎn)品配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5、操作過程及要求：(1)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。(2)為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。(3)★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。(4)為實現(xiàn)一次檢多病種，RNA類產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(5)※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本品目內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。(6)反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。(7)反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6、實驗結果判定：(8)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(9)結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7、有效期：到用戶手上有效期應≥9個月。8、保存條件：-20℃保存。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品國家參 考實驗室驗證報告。10、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家參與現(xiàn)行有效國家標準制定的證明，附需附由生產(chǎn)廠家蓋章的國家標準；11、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-3：禽流感病毒H7亞型熒光RT-PCR試劑盒1、用途：用于檢測H7亞型禽流感病毒。2、實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3、靈敏度和特異性：對于感染性雞胚尿囊液，熒光RT-PCR檢測的最高稀釋度為10-8～10-7，與雞胚病毒分離靈敏度接近。能夠檢測禽肉和組織臟器中的H9亞型禽流感病毒，與雞胚病毒分離靈敏度接近。對于其余禽類疾病，相應試劑盒檢測結果應為陰性。4、產(chǎn)品配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5、操作過程及要求：(10)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。(11)為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。(12)★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。(13)為實現(xiàn)一次檢多病種，RNA類產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(14)※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本品目內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。(15)反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。(16)反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6、實驗結果判定：(17)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(18)結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7、有效期：到用戶手上有效期應≥9個月。8、保存條件：-20℃保存。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品國家參 考實驗室驗證報告。10、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家參與現(xiàn)行有效國家標準制定的證明，附需附由生產(chǎn)廠家蓋章的國家標準；11、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-4：禽流感病毒H9亞型熒光RT-PCR試劑盒1、用途：用于檢測H9亞型禽流感病毒。2、實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3、靈敏度和特異性：對于感染性雞胚尿囊液，熒光RT-PCR檢測的最高稀釋度為10-8～10-7，與雞胚病毒分離靈敏度接近。能夠檢測禽肉和組織臟器中的H9亞型禽流感病毒，與雞胚病毒分離靈敏度接近。對于其余禽類疾病，相應試劑盒檢測結果應為陰性。4、產(chǎn)品配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5、操作過程及要求：(19)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。(20)為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。(21)★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。(22)為實現(xiàn)一次檢多病種，RNA類產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(23)※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本品目內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。(24)反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。(25)反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6、實驗結果判定：(26)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(27)結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7、有效期：到用戶手上有效期應≥9個月。8、保存條件：-20℃保存。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品國家參 考實驗室驗證報告。10、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家參與現(xiàn)行有效國家標準制定的證明，附需附由生產(chǎn)廠家蓋章的國家標準；11、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-5：新城疫病毒等禽病熒光RT-PCR試劑盒1.用途：用于檢測新城疫等禽病病毒。2.實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3.靈敏度和特異性：對于新城疫感染性雞胚尿囊液，熒光RT-PCR檢測的最高稀釋度為10-8～10-7，與雞胚病毒分離靈敏度接近。能夠檢測禽肉和組織臟器中的新城疫病毒，與雞胚病毒分離靈敏度接近。對于其余禽類疾病，相應試劑盒檢測結果應為陰性。4.產(chǎn)品配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5.操作過程及要求：(1)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。(2)為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。(3)★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。(4)為實現(xiàn)一次檢多病種，RNA類產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(5)※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本品目內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。(6)反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。(7)反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6.實驗結果判定：(1)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(2)結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7.有效期：到用戶手上有效期應≥9個月。8.保存條件：-20℃保存。11、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-6：CSFV/PRRS/HP-PRRS/FMD/PRRS+HP-PRRS/PPR等畜群疫病RNA病毒熒光定量RT-PCR試劑盒1.用途：用于檢測CSFV/PRRS/HP-PRRS/FMD/PRRS+HP-PRSS/PPR等畜群疫病病毒。2.實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3.敏感性和特異性：對所檢病種，應能覆蓋所有毒株，對其他病種應不能檢出。4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5.操作過程及要求(1)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。(1)為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。(2)★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。(3)為實現(xiàn)一次檢多病種，上述畜病檢測的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(4)※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本品目內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。(5)反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。(6)反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6.實驗結果判定(1)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(2)結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7.保存條件：-20℃保存。8.到用戶手上有效期：≥9個月。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-7：PRV/PCV2/PCV3/PPV/SS2/PRV-PCV/PRV-PPV-PCV等畜群疫病DNA病毒熒光定量PCR試劑盒 1.用途：(1)PRV熒光PCR能夠檢測豬偽狂犬病病毒。(2)PCV2熒光PCR能夠檢測豬圓環(huán)2型病毒。(3)PCV3熒光PCR能夠檢測豬圓環(huán)3型病毒。(4)PPV熒光PCR能夠檢測豬細小病病毒。(5)SS2熒光PCR能夠檢測豬鏈球菌。(6)PRV-PCV熒光PCR能夠檢測豬偽狂犬病病毒和豬圓環(huán)病毒。(7)PRV-PPV-PCV熒光PCR能夠檢測豬偽狂犬病病毒、豬細小病毒和豬圓環(huán)病毒。2.原理：Taqman探針，熒光PCR方法。3.敏感性和特異性：對所檢病種，應能覆蓋所有毒株，對其他病種應不能檢出。4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑；5.操作過程及要求(1)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（含模板）(2)為實現(xiàn)一次檢多病種，上述產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(3)25μL≤反應體系≤50μL，其中RT-PCR反應液≥23μL，Taq酶≥0.25μL，模板≥2μL(4)反應要求：92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6.實驗結果判定(1)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(2)結果判定：Ct值≤35.0的樣本為陽性。7.保存條件：-20℃保存8.到用戶手上有效期：≥9個月。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-8：鴨瘟病毒熒光定量PCR 1.用途：用于檢測鴨瘟病毒2.原理：Taqman探針，熒光PCR方法。3.敏感性和特異性：對所檢病種，應能覆蓋所有毒株，對其他病種應不能檢出。4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑；5.操作過程及要求(1)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（含模板）(2)為實現(xiàn)一次檢多病種，上述產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(3)25μL≤反應體系≤50μL，其中RT-PCR反應液≥23μL，Taq酶≥0.25μL，模板≥2μL(4)反應要求：92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6.實驗結果判定(1)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立(2)結果判定：Ct值≤35.0的樣本為陽性7.保存條件：-20℃保存8.到用戶手上有效期：≥9個月。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-9：布魯菌熒光PCR檢測試劑盒1.用途：用于檢測布魯氏菌核酸。2.原理：Taqman探針，熒光PCR方法。3.敏感性和特異性：應能檢出所有布魯氏菌，對其他病種應不能檢出。4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5.操作過程及要求(1)※為簡化操作過程，引物、探針、反應液及酶等所有成分全部預裝整合為凍干狀態(tài)，使用時除加入模版和補水外，無需添加任何成份。(2)★要求含內(nèi)標。(3)反應體系≤25μL，其中模板≥10μL。(4)反應要求：92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。目的基因FAM通道；內(nèi)標HEX通道。6.實驗結果判定(1)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0，內(nèi)標Ct值應≤28.0，視為成立。(2)結果判定：Ct值≤35.0的樣本為陽性。7.保存條件：常溫保存。8.到用戶手上有效期：≥9個月。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線）。10、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品實物1個。品目號3-10：禽流感病毒H5/A/H9/H7/ND等禽群疫病熒光定量（RT）-PCR（多重）1.用途：AI/ND雙重熒光PCR可一個反應檢測禽流感病毒和新城疫病毒。 H5/H9/H7三重熒光PCR可一個反應檢測H5/H9/H7亞型禽流感病毒。2.實驗原理：Taqman探針，熒光RT-PCR方法。3.靈敏度和特異性：對于感染性雞胚尿囊液，熒光RT-PCR檢測的最高稀釋度為10-8～10-7，與雞胚病毒分離靈敏度接近。能夠檢測禽肉和組織臟器中的相應病毒，與雞胚病毒分離靈敏度接近。對于其余禽類疾病，相應試劑盒檢測結果應為陰性。4.產(chǎn)品配置：反應次數(shù)48次/盒，無須核酸提取試劑。5.操作過程及要求：(1)為簡化操作過程，體系構成組份應≤3種（不含模板）。(2)為縮短檢測時間，RT和PCR擴增應實施一步法。(3)★為使檢測質(zhì)控品覆蓋檢測全程，陽性對照應采用體外反轉錄RNA。(4)為實現(xiàn)一次檢多病種，RNA類產(chǎn)品的擴增過程應完全一致，可以在同一熒光PCR儀上同時擴增。(5)※為提高檢測的重復性，應使用RT-PCR固態(tài)酶球，且酶球在室溫條件下可置于干燥器內(nèi)保存≥24個月，有效延長核心組分的保質(zhì)期。本品目內(nèi)不同病種檢測試劑的固態(tài)酶球應可以互換使用。(6)反應體系：RT-PCR反應液≥15μL，Taq酶≥0.25μL，加入≥1/4顆RT-PCR酶顆粒，模板≥10μL。(7)反應要求：42℃≤30min。92℃≤3min。92℃≤10s，45℃≤30s，72℃≤1min，5個循環(huán)。92℃≤10s，60℃≤30s并收集信號，40個循環(huán)。FAM通道。6.實驗結果判定：(1)有效性判定：陰性對照無曲線，陽性對照的Ct值應≤28.0視為成立。(2)結果判定：Ct值無數(shù)值的樣本為陰性樣本。Ct值≤30.0的樣本為陽性。Ct值大于30.0的樣本建議重做。重做結果無數(shù)值者為陰性，否則為陽性。7.有效期：到用戶手上有效期應≥9個月。8.保存條件：-20℃保存。9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-11：牛結節(jié)性皮膚病熒光PCR診斷試劑盒1.用途：牛結節(jié)性皮膚病病毒（LSDV）核酸的檢測。2.原理：熒光PCR3.樣本要求:牛的皮膚結節(jié)或結痂周圍組織病料，唾液、口腔或鼻腔拭子、牛奶、 精液，或者抗凝全血（EDTA 抗凝）4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：50T/盒；5.操作過程及要求(1)PCR反應液≥20ul，對照品或樣本≦5ul，總反應體系應20≦反應體系≦25ul。(2)擴增程序:50℃預變性≥2分鐘，95℃變性≦5分，95℃變性≦15秒，58℃延伸≦60秒，≦40個循環(huán)，設置58℃收集FAM熒光信號.6.實驗結果判定(1)陽性對照應出現(xiàn)特異性擴增曲線且 Ct 值≤35，且陰性對照無特異性擴增曲線或無 Ct 值，則試驗成立；否則試驗不成立。(2)樣品的擴增結果有典型的擴增曲線且 Ct 值＜40 時可判定為牛結節(jié)性皮膚病病毒核酸陽性；當樣品的擴增結果無 Ct 值時，判定為牛結節(jié)性皮膚病病毒核酸陰性。7.保存條件：-20℃保存8.到用戶手上有效期：≥12月9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-12：非洲馬瘟熒光PCR診斷試劑盒1.用途：非洲馬瘟病毒（AHSV）核酸的檢測。2.原理：熒光PCR3.樣本要求:馬的脾、肺和淋巴結等組織病料和血液等液體病料。4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：50T/盒；5.操作過程及要求(1) RT-PCR反應液≥20ul，對照品或樣本≦5ul，總反應體系應20≦反應體系≦25ul。 (2)擴增程序:48oC≥25分鐘；95oC ≥10 分鐘;95oC≥15秒，55oC≥35秒，72℃≥30秒，共40個循環(huán)；55oC收集FAM 熒光信號.6.實驗結果判定陽性對照應出現(xiàn)特異性擴增曲線且Ct值≤35，且陰性對照無特異性擴增曲線或無Ct 值，則試驗成立；否則試驗不成立。當樣品的擴增結果有典型的擴增曲線且 Ct值≤35 時可判定為非洲馬瘟病毒核酸陽性，Ct值＞40或無Ct值時可判定為非洲馬瘟病毒核酸陰性；當樣品35＜Ct值≤40時判定為非洲馬瘟病毒核酸可疑，需重新提取核酸，重復檢測仍為可疑則判定為非洲馬瘟病毒核酸陽性。7.保存條件：-20℃保存8.到用戶手上有效期：≥12月9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-13：口蹄疫和塞內(nèi)卡病毒直接擴增熒光RT-PCR檢測試劑盒1、用途：檢測口蹄疫和塞尼卡谷病毒RNA2、不需要樣本核酸提取純化3、陰、陽性對照均不需提取，直接作為模板即可4、試劑自帶裂解液；試劑盒自帶試劑可處理液體樣品和固體樣品，不需額外配備5、儲存條件：PCR系統(tǒng)部分試劑儲存于-20℃及以下，其余試劑儲存于4℃。6、有效期：≥12個月。7、規(guī)格：50T盒；8、操作過程：擴增試劑配制，體系構成組份≤3種（不含模板）；總體積≥50μL。其中直擴RT-qPCR反應液體≥38μL，直擴RT-qPCR酶≥2μL，直擴RT-qPCR引物≥5μL，模板≥5μL。熒光基團為FAM和HEX；9、結果判定：分析條件設置：陽性Ct值≤25，陰性對照擴增曲線無Ct值顯示，二者均成立才可判定試驗成立，否則試驗無效。如果檢測樣本FAM通道Ct值≤30，報告為口蹄疫病毒檢測陽性；如果檢測樣本HEX通道Ct值≤30，報告為塞尼卡谷病毒檢測陽性。如果檢測樣本FAM通道30＜Ct值≤35時為口蹄疫可疑，需重新對樣本進行檢測。若重復檢測該樣本Ct值≤30，則判為口蹄疫陽性；若重復檢測Ct值＞30，則判為口蹄疫陰性。如果檢測樣本HEX通道30＜Ct值≤35時為塞尼卡谷可疑，需重新對樣本進行檢測。若重復檢測該樣本Ct值≤30，則判為塞尼卡谷陽性；若重復檢測Ct值＞30，則判為塞尼卡谷陰性。如果檢測樣本FAM通道的Ct值＞35或者無數(shù)值，則判為口蹄疫陰性；如果檢測樣本HEX通道的Ct值＞35或者無數(shù)值，則判為塞尼卡谷陰性；10、產(chǎn)品由國家權威機構（即國家參 考實驗室）參與研制。品目號3-14：口蹄疫和塞內(nèi)卡病毒雙重熒光RT-PCR檢測試劑盒1、用途：檢測口蹄疫和塞尼卡谷病毒RNA2、樣本需要核酸提取純化3、規(guī)格：50T盒；4、儲存條件：-20℃及以下5、有效期：≥12個月。6、操作過程：擴增試劑配制，體系構成組份≤4種（不含模板）；總體積≥25μL，其中樣本RNA≥2uL7、熒光基團為FAM和HEX；8、結果評價：陽性Ct值≤30，陰性對照擴增曲線無Ct值顯示。如果檢測樣本FAM通道Ct值≤30，報告為口蹄疫病毒檢測陽性；如果檢測樣本HEX通道Ct值≤30，報告為塞尼卡谷病毒檢測陽性。如果檢測樣本FAM通道30＜Ct值＜36時為口蹄疫或塞內(nèi)卡可疑，需重新對樣本進行檢測。如果檢測樣本FAM通道的Ct值≥36，則判為口蹄疫陰性；如果檢測樣本HEX通道的Ct值≥36，則判為塞尼卡谷陰性；9、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-15：豬瘟兔化弱毒疫苗與豬瘟野毒株雙重,豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲型經(jīng)典株與高致病性變異株雙重，豬繁殖與呼吸綜合征病毒歐洲株與美洲株雙重，豬圓環(huán)病毒1型/2型雙重，豬圓環(huán)病毒2型/3型雙重實時熒光PCR檢測試劑盒1.無核酸提取試劑。擴增用試劑-20℃保存；2.敏感性達到98%以上。特異性：特異性達到100%。3.批內(nèi)及批間差異≤3%。4.規(guī)格：50份/盒。5.反應程序：95℃≤2min；循環(huán)95℃≤5s，60℃≤35s，共40次，每次循環(huán)的第二步（60℃≤35s）分別收集熒光信號。6.其中之一檢測項目熒光報告基團為FAM，另一檢測項目熒光報告基團為HEX，淬滅基團均為None。7.20≦反應體系≦25ul。8.實驗成立判定：陽性對照Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線，陰性對照無Ct值并且無特定擴增曲線。9.實驗結果判定：被檢樣品若FAM或HEX熒光信號Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線為相應檢測項目核酸陽性；被檢樣品30＜Ct＜37并出現(xiàn)特定的擴增曲線，需重新取樣提取DNA，擴增后進行結果判定，如仍是可疑，則判定為陽性；被檢樣品Ct值≥37時，超過本方法檢測靈敏度范圍，判定為陰性；對于某些未呈現(xiàn)S型曲線，但本底較高的樣品，應為陰性。10.到用戶手上有效期≥9個月。11、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-16：FAM熒光基團檢測禽流感病毒A/H5/H7/H9/N6/N9/ND熒光RNA病毒檢測試劑盒1.無核酸提取試劑。-20℃保存；覆蓋全部禽流感H9亞型毒株，敏感性達到98%以上，靈敏度與雞胚分離法接近。2.規(guī)格：50份/盒。3.反應程序：45℃≤15min，95℃≤1min；95℃≤5s，60℃≤35s，在每個循環(huán)第二步（60℃≤35s）收集熒光信號，共≤40個循環(huán)。（報告基團“FAM”，淬滅基團“None”）。4.反應體系為≥20μL。5.結果判定：陽性對照Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線，陰性對照無Ct值并且無特定擴增曲線，實驗結果成立；被檢樣品Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線為陽性；被檢樣品30＜Ct＜37并出現(xiàn)特定的擴增曲線，需重新取樣提取RNA，擴增后進行結果判定，如仍是可疑，可判定為陽性；被檢樣品Ct值≥37時，超過本方法檢測靈敏度范圍，判定為陰性；對于某些未呈現(xiàn)S型曲線，但本底較高的樣品，應為陰性。6.到用戶手上有效期≥9個月。7、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-17：FAM熒光基團檢測PRRS/HP-PRRS/ HP-PRRS ？JXA1-R株/PRRS 美洲株/PRRS 歐洲株/ PRRS 類NADC-30毒株/ FMD通用/Asia-I型/O型/A型/C型/BVDV/牛冠狀病毒/牛副流感病毒/牛合胞體病毒/小反芻獸疫/小反芻獸疫病毒野毒株/狂犬病/犬瘟熱/犬貓冠狀病毒/犬副流感病毒/貓杯狀病毒/哺乳動物呼腸孤病毒/熒光RNA病毒檢測試劑盒1.無核酸提取試劑。-20℃保存；覆蓋全部禽流感H9亞型毒株，敏感性達到98%以上，靈敏度與雞胚分離法接近。2.規(guī)格：50份/盒。3.反應程序：45℃≤15min，95℃≤1min；95℃≤5s，60℃≤35s，在每個循環(huán)第二步（60℃≤35s）收集熒光信號，共≤40個循環(huán)。（報告基團“FAM”，淬滅基團“None”）。4.反應體系為≥20μL。5.結果判定：陽性對照Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線，陰性對照無Ct值并且無特定擴增曲線，實驗結果成立；被檢樣品Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線為陽性；被檢樣品30＜Ct＜37并出現(xiàn)特定的擴增曲線，需重新取樣提取RNA，擴增后進行結果判定，如仍是可疑，可判定為陽性；被檢樣品Ct值≥37時，超過本方法檢測靈敏度范圍，判定為陰性；對于某些未呈現(xiàn)S型曲線，但本底較高的樣品，應為陰性。6.到用戶手上有效期≥9個月。？7、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-18：FAM熒光基團檢測PRV/PRVgE/PPV/PCV1/PCV2/PCV3/豬流行性腹瀉病毒/豬輪狀病毒/豬傳染性胃腸炎/布魯氏菌病/JEV/BB/牛皰疹病毒Ⅰ型/弓形蟲/鉤端螺旋體/犬細小病毒/犬細小病毒野毒株/貓泛白細胞減少癥病毒/貓皰疹病毒1型/衣原體/熒光PCR DNA病毒檢測試劑盒1.無核酸提取試劑。擴增用試劑-20℃保存；2.適用于檢測所有PRV毒株，敏感性98%。批內(nèi)及批間差異≤3%。3.規(guī)格：50份/盒。4.反應程序：95℃≤2min；循環(huán)95℃≤5s，60℃≤35s，共40次，每次循環(huán)的第二步（60℃≤35s）收集熒光信號（報告基團“FAM”，淬滅基團“None”）。5.反應體系為≥20μL。6.結果判定：陽性對照Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線，陰性對照無Ct值并且無特定擴增曲線，實驗結果成立；被檢樣品Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線為陽性；被檢樣品30＜Ct＜35并出現(xiàn)特定的擴增曲線，需重新取樣提取DNA，擴增后進行結果判定，如仍是可疑，則判定為陽性；被檢樣品Ct值≥35時，超過本方法檢測靈敏度范圍，判定為陰性；對于某些未呈現(xiàn)S型曲線，但本底較高的樣品，應為陰性。7.到用戶手上有效期≥9個月。？8、★評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)廠家獸藥GMP證書（驗收范圍含分子生物學類診斷制品生產(chǎn)線），或相應有效證明。品目號3-19：小通量磁珠法病毒核酸提取試劑盒1.用途：用于提取病毒核酸。2.原理：利用磁珠吸附原理，從病毒樣本中提取RNA/DNA試劑。3.產(chǎn)品規(guī)格及配置：(1)64次/盒，試劑已分裝成96孔板，16樣/板。(2)中文說明書。(3)為簡化操作規(guī)程，產(chǎn)品中所有試劑（除蛋白酶K和Carrier）均已預分裝于96孔板。(4)不需要配套任何耗材（加樣品槍頭除外）。(5)配套耗材應適用于本中心實驗室天根32通道自動核酸提取儀器，防止因耗材不匹配導致提取儀損壞。因耗材不匹配導致儀器損壞的，采購人有權要求合同中標方做出相應賠償。(6)為減少人工復雜勞動，每次操作中涉及的96孔深孔板數(shù)量應≤1塊。4.操作過程及要求(1)廠家應編輯好運行程勛，導入直接使用即可。(2)樣本經(jīng)裂解后、洗滌、洗脫、棄磁珠，樣本核酸溶解在同一塊深孔板中。(3)為提高核酸提取效率，DNA裂解和洗脫操作時應有加熱操作（不低于70攝氏度）。(4)為防止RNA降解，RNA裂解和洗脫操作時應有低溫操作。(5)樣品需平衡至室溫，在第1排和第7排孔中加入≤200μL樣品、蛋白酶K和Carrier。運行程序即可。程序完畢，取出核酸或直接用封口膜封好并保存于-20℃或-80℃。5.實驗有效性判定：核酸洗脫孔無磁珠吸附沉淀。6.保存條件：4℃保存，其中部分蛋白類組分應-20℃保存。7.到用戶手上有效期：≥6個月。8.其他要求：含透明封口膜2張。品目號3-20：大通量磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒1.用途：用于提取病毒核酸。2.原理：磁珠法。3.產(chǎn)品規(guī)格及配置：(1)96次/盒。(2)中文說明書。(3)為簡化操作規(guī)程，產(chǎn)品中所有試劑（除蛋白酶K）均已預分裝于96孔板。(4)不需要配套任何耗材（加樣品槍頭除外）。(5)配套耗材應適用于本中心實驗室96孔核酸提取儀（Thermol Kingfisher Flex），防止因耗材不匹配導致提取儀損壞。因耗材不匹配導致儀器損壞的，采購人有權要求產(chǎn)品合同中標方做出相應賠償。(6)為減少操作，操作過程中涉及的96孔深孔板數(shù)量應≤4塊。4.操作過程及要求(1)廠家應編輯好運行程勛，導入直接使用即可。(1)樣品需平衡至室溫。用前500rpm×1min進行離心。磁板套放入磁珠懸浮液G_Tip板。加入蛋白酶。96孔板(Buffer RLCP板)中加入200μL樣品。運行程序即可。程序完畢，取出核酸，用封口膜封好并保存于-20℃或-80℃。5.實驗有效性判定：無磁珠吸附沉淀。6.保存條件：常溫保存7.到用戶手上有效期：≥9個月。8.其他要求：(1)含透明封口膜2張。(2)含10μL長槍頭2盒（96孔/盒，適用于EP移液器），槍頭長度≥7cm。(3)含200μL長槍頭2盒（96孔/盒，適用于EP移液器）。品目號3-21：過濾柱型病毒核酸提取試劑盒1.用途：從細胞、組織、全血、骨髓、體液、細菌、病毒中提取核酸，用于普通RT-PCR，定量RT-PCR或cDNA合成等。2.原理：過濾柱法提取核酸。3.產(chǎn)品規(guī)格及配置：100次/盒。4.操作過程及要求(1)裂解，取樣本≤200uL，加入裂解液≥500uL，混勻裂解；(2)吸附，裂解物加入過濾內(nèi)套管，離心吸附；(3)清洗，外套管液體倒去，內(nèi)套管加入清洗液≥500uL，離心清洗；重復一次；(4)甩干，外套管液體倒去，內(nèi)套管空管離心甩去液體；(5)洗脫，更換外套管，內(nèi)套管加入洗脫液(25-50)μL，離心洗脫。5.保存條件：室溫保存。6.到用戶手上有效期：≥6個月。
品目號2-1：（★核心產(chǎn)品）豬瘟病毒抗體阻斷ELISA檢測試劑盒1、用途：適用于檢測豬血清中豬瘟病毒抗體。2、原理：阻斷型或競爭型ELISA3、試劑盒規(guī)格：2╳96/盒；4、操作規(guī)程及要求：總反應時長不多于2.5小時；5、保存條件：2？8℃保存；6、到用戶手上有效期：≧6個月。7、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸醫(yī)局、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心及分中心、中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或所投產(chǎn)品國家參 考實驗室）參與研制；※8、評標時，投標人應提供：包被豬瘟蛋白單克隆抗體的聲明?！?、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品實物1個。※10、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)應具有獸藥GMP證書（驗收范圍含免疫學類診斷制品生產(chǎn)線生產(chǎn)）或相應有效證明?！?1、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品中文使用說明書，其中應有阻斷型（或競爭型）和單抗等表述或等同描述。投標人應在說明書上做特殊標記，以突出顯示，方便評審專家核對。品目號2-2：非洲豬瘟抗體ELISA試劑盒1.用途：檢測非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體。 2.原理：ELISA3.樣本要求:血清4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：（1）2×96/盒；（2）洗滌液為20倍濃縮液，其余試劑為即用試劑，不需稀釋。5.操作過程及要求在 A1 和 B1 孔加入 ASFV 陰性血清（III）各≥50μl；在 C1 和 D1 孔加入 ASFV 陽性血清（IV）各≥50μl；剩余孔加入≥50μl 樣品，37℃孵育≤20 分鐘，洗板；每孔加入≥50μl的酶標抗原，37℃孵育≤20 分鐘，洗板；每孔加入≥50μl 底物溶液 A（VII），每孔再加入≥50μl 底物溶液 B（VIII），37℃避光孵育 10-15 分鐘；每孔加入≥50μl 的終止液（IX）終止顯色反應；使用酶標儀測定 450nm 波長處的 OD 值。 6.實驗結果判定(1)試驗成立條件：ODNC值≤0.15 且 ODPC值≥0.6，試驗結果有效；否則重新進行試驗。 (2) 判定：Cut Off 值≤0.15，結果判為陰性；Cut Off 值＞0.15，結果判為陽性。 7.保存條件：+2℃－+8℃保存8.到用戶手上有效期：≥6個月?！?.所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域權威機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-3：牛結核分枝桿菌抗體ELISA檢測試劑盒1.用途：檢測牛血清中分枝桿菌特異性抗體。 2.原理：ELISA3.產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒；；4.操作過程及要求陰性對照、陽性對照、待檢樣本各≤100μl，37℃≤30 分鐘，洗板；加入酶標抗體≤100μl，37℃≤30 分鐘，洗板；底物溶液≤100uL，室溫≤9分鐘；終止液≤100uL，450nm讀數(shù)5.實驗結果判定陽性對照≥0.5；陰性對照＜0.2；S/P≥0.205，結果陽性；S/P＜0.205，結果陰性；6.到客戶手上有效期：≥6個月。7、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心及分中心、中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或所投產(chǎn)品國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-4：馬鼻疽提純鼻疽菌素1、用途：用于診斷馬屬動物的鼻疽病。2、原理：采用變態(tài)反應方法。3、產(chǎn)品規(guī)格及配置：6mg/瓶。4、操作過程及要求4.1點眼法:先將凍干提純鼻疽菌素稀釋成lmg/ml（液體提純菌素用原液）,然后0.3ml滴于（約3？4滴）被檢動物的健康眼結膜囊內(nèi)。分別于3、6、9、24小時檢査反應。4.2皮內(nèi)注射法：在頸中部上皮膚處剪毛（直徑3？10cm）,用游標卡尺測量剪毛處中央皮皺厚度，作好記錄。注射前用75%酒精消毒。將凍干提純鼻疽菌素稀釋成0.5mg/ml，不論大小動物一律皮內(nèi)注射O.lmL注射部位應出現(xiàn)小泡，如有疑問時應另選15cm以外的部位或?qū)戎匦伦⑸洹?、實驗結果判定5.1點眼法:陰性反應（一）：點眼后沒有反應，或結膜輕微充血及流淚?？梢煞磻ㄍ粒貉劢Y膜潮紅，有彌漫性浮腫和灰白色粘液性（非膿性）眼験。弱陽性反應（ + ）：眼結膜發(fā)炎，浮腫明顯，并含有少量的膿性眼豚，或在灰白色粘液性眼豚中混有膿性眼豚。陽性反應（ + + ）：眼瞼浮腫，眼睛呈半開狀態(tài)，出現(xiàn)中等量眼豚。強陽性反應（ + + + ）：眼反應特別明顯，上下眼瞼互相膠著，出現(xiàn)大量膿液。陰性和可疑的馬、驢、騾，經(jīng)過5？6天后重檢。重檢時，在第一次點眼的同一眼睛內(nèi)滴入鼻疽菌素3？4滴。經(jīng)過3、6、9、24小時后，分別按前述標準判定結果。5.2皮內(nèi)注射法：注射后72小時判定，仔細觀察注射部位有無熱痛，腫脹等炎性反應，并用卡尺測量皮皺厚度，作好詳細記錄。判定標準如下：陽性反應（ + ）：局部有明顯的炎性反應，皮皺厚度差N4.0mm。疑似反應（土）：局部的炎性反應不明顯，皮皺厚度差在2.0？4.0mm之間。陰性反應（一）：局部無炎性反應，皮皺厚度差W2.0mm。對于疑似反應動物可與72小時判定后即刻在另一側用同一批菌素同一劑量進行第二次注射，再經(jīng)72小時觀察反應。6、保存條件：8℃以下保存。7、到用戶手上有效期：≥2年。品目號2-5：馬傳染性貧血ELISA檢測試劑盒1、用途用于檢測馬血清中馬傳染性貧血病毒抗體。2、原理：ELISA。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒。5、操作過程及要求樣品≤60μL，陰陽性原液2孔≤60μL，分別加入酶標抗原≤60μL，37℃孵育≤30min。取出包被板，孵育后的樣品每孔≤100μL，37℃孵育≤30min。洗板。加底物溶液≤100μL。室溫避光孵育≤5min。加終止液≤50uL，450nm檢測。6、實驗結果判定(1)成立條件:陽性對照OD450值＜0.20，陰性對照OD450值＞1.0。(2)結果判定:檢測血清樣品抑制率≥55%時，判定為陽性樣品。檢測血清樣品抑制率＜55%時，判定為陰性樣品。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-6：馬傳染性貧血瓊脂擴散實驗標準抗原1、用途：用于瓊脂擴散試驗診斷馬傳染性貧血。2、原理：瓊脂擴散試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求用含0.01%硫柳汞的PBS制備1%瓊脂平板，按六角形打孔，孔徑為5mm，孔距為3mm。中心孔滴加抗原，陽性血清滴加外周2、4孔，6孔加陰性血清，被檢血清滴加1、3、5孔，滴加時以孔滿為度。置15℃？30℃ 72小時，于24、48及72小時各觀察1次。 6、實驗結果判定當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，陰性血清與抗原孔之間無沉淀線，而被檢血清與抗原孔間也有明顯沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔內(nèi)側偏彎時，該被檢血清為陽性。當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，而被檢血清與抗原孔間無沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔直伸或向外偏彎時，該被檢血清為陰性。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-7：馬傳染性貧血瓊脂擴散實驗標準陽性血清1、用途：用于瓊脂擴散試驗診斷馬傳染性貧血。2、原理：瓊脂擴散試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求用含0.01%硫柳汞的PBS制備1%瓊脂平板，按六角形打孔，孔徑為5mm，孔距為3mm。中心孔滴加抗原，陽性血清滴加外周2、4孔，6孔加陰性血清，被檢血清滴加1、3、5孔，滴加時以孔滿為度。置15℃~30℃ 72小時，于24、48及72小時各觀察1次。 6、實驗結果判定當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，陰性血清與抗原孔之間無沉淀線，而被檢血清與抗原孔間也有明顯沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔內(nèi)側偏彎時，該被檢血清為陽性。當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，而被檢血清與抗原孔間無沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔直伸或向外偏彎時，該被檢血清為陰性。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-8：小反芻獸疫抗體競爭ELISA試劑盒1.用途：小反芻獸疫病毒（PPRV）抗體。 2.原理：ELISA3.樣本要求:綿羊、山羊等血清或血漿4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：（1）5×96/盒；；（2）洗滌液為20倍濃縮液，其余試劑為即用試劑，不需稀釋。5.操作過程及要求在 A1 和 B1 孔加入 ASFV 陰性血清（III）各≥50μl；在 C1 和 D1 孔加入 ASFV 陽性血清（IV）各≥50μl；在 E1 和 F1 孔加入樣品稀釋液（II）各≥50μl；剩余孔加入≥25μl樣品稀釋液，然后加入≥25μl樣品；37℃孵育≥60 分鐘，洗板；每孔加入≥50μl的酶標抗體，37℃孵育≥30分鐘，洗板；每孔加入≥50μl底物溶液，室溫下避光孵育15分鐘； 每孔加入≥50μl的終止液終止顯色反應；使用酶標儀測定 450nm 波長處的 OD 值。 6.實驗結果判定(1)試驗成立條件：根據(jù)抑制率判定檢驗結果，PIPC＞60，PINC＜40，試驗結果有效；否則重新進行試驗。(2)判定：PIS＞50，結果為陽性；PIS≤50，結果為陰性。7.保存條件：+2℃－+8℃保存8.到用戶手上有效期：≥6個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心及分中心、中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或所投產(chǎn)品國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-9：禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）血凝抑制試驗標準抗原1、用途：用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔中加入0.025ml血清，將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-10：禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）血凝抑制試驗標準陽性血清1、用途：用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔中加入0.025ml血清，將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-11：禽流感病毒H7（Re-2）血凝抑制試驗標準抗原1、用途：用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H7（Re-2）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔加入0.025ml血清，在反應板上將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-12：禽流感病毒H7（Re-2）血凝抑制試驗標準陽性血清1、用途:用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H7（Re-2）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔加入0.025ml血清，血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-13：禽流感病毒血凝抑制試驗標準陰性血清1、用途:用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔中加入0.025ml血清，將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-14：禽白血病AB亞型抗體ELISA檢測試劑盒1、用途:用于檢測雞血清中禽白血病病毒AB亞群抗體。2、原理：ELISA。3、樣本要求:雞血清。4、產(chǎn)品規(guī)格：5×96/盒。5、操作過程及要求樣品及對照品≥100μl/孔，在 37℃下孵育≤30分鐘。洗滌。加入酶標抗體≥100μl/孔，置37℃溫箱孵育≤30分鐘。洗滌，加入底物溶液≥100μl/孔，置室溫（15~25℃）避光孵育≤15分鐘。加入終止液≥100μl/孔，450nm下讀取OD450nm值。6、實驗結果判定0.6＜陽性對照血清OD450nm值均≤1.3，陰性對照血清OD450nm值均＜0.10，試驗方可成立。待檢樣品S/P值≥0.2時，判為陽性；待檢樣品S/P值＜0.2時，判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-15：禽白血病病毒J型抗體ELISA檢測試劑盒1、用途:用于檢測雞血清中禽白血病病毒J亞群抗體。2、原理：ELISA。3、樣本要求:雞血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：5×96/盒。5、操作過程及要求樣品及對照品≥100μl/孔，在 37℃下孵育≤30分鐘。洗滌。加入酶標抗體≥100μl/孔，置37℃溫箱孵育≤30分鐘。洗滌，加入底物溶液≥100μl/孔，置室溫（15~25℃）避光孵育≤15分鐘。加入終止液≥100μl/孔，450nm下讀取OD450nm值。6、實驗結果判定 0.55＜陽性對照血清OD450nm值均≤1.25，陰性對照血清OD450nm值均＜0.10，試驗方可成立。判定，待檢樣品S/P值≥0.3時，判為陽性；待檢樣品S/P值＜0.3時，判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-16：禽白血病病毒P27抗原ELISA檢測試劑盒1、用途用于檢測蛋清、泄殖腔拭子、病毒培養(yǎng)液等樣品中禽白血病病毒 p27 蛋白，檢測結果可用于 ALV 感染的輔助診斷。2、原理：ELISA。3、樣本要求:蛋清、泄殖腔拭子、病毒培養(yǎng)液等樣品。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：5×96/盒。5、操作過程及要求樣品及對照品≥100μl/孔，在 37℃下孵育≤30分鐘。洗滌。加入酶標抗體≥100μl/孔，置37℃溫箱孵育≤1小時。洗滌，加入酶標抗體≤100μl/孔，在 37℃下孵育≤1小時。 洗滌，加入底物溶液 A≤50μl/孔；加入底物溶液 B≤50μl/孔，在室溫（15~25℃）下，避光孵育≤15分鐘。加入終止液≤50μl/孔，630nm 的波長下讀數(shù)。6、實驗結果判定陽性對照品孔的平均 OD630nm 值＞0.20，陰性對照品孔的平均 OD630nm 值＜0.10。 檢測樣品 S/P 值≥0.2 時，判定為陽性樣品；檢測樣品 S/P 值＜0.2 時，判定為陰性樣品。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥9個月。品目號2-17：雞白痢平板凝集實驗標準抗原1、用途：用于全血平板凝集試驗診斷雞白痢、雞傷寒。2、原理：采用平板凝集方法。3、樣本要求:血液。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：15毫升/瓶。5、操作過程及要求用滴管吸取抗原，垂直滴于玻板上l滴（相當于0.05ml），然后用針頭刺破雞的肱靜脈或冠尖，取血0.05ml（相當于內(nèi)徑7.5～8.0mm金屬絲環(huán)的2滿環(huán)血液），與抗原混合均勻，并涂散成直徑約2.0cm的液面，2分鐘內(nèi)判定結果。6、實驗結果判定發(fā)生50%(++)以上凝集，為陽性；不發(fā)生凝集，為陰性；界于上述兩者之間，為可疑。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-18：雞白痢平板凝集實驗標準血清1、用途：用于全血平板凝集試驗診斷雞白痢、雞傷寒。2、原理：采用平板凝集方法。3、樣本要求:血液。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求用滴管吸取抗原，垂直滴于玻板上l滴（相當于0.05ml），然后用針頭刺破雞的肱靜脈或冠尖，取血0.05ml（相當于內(nèi)徑7.5～8.0mm金屬絲環(huán)的2滿環(huán)血液），與抗原混合均勻，并涂散成直徑約2.0cm的液面，2分鐘內(nèi)判定結果。6、實驗結果判定發(fā)生50%(++)以上凝集，為陽性；不發(fā)生凝集，為陰性；界于上述兩者之間，為可疑。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-19：狂犬病抗體ELISA試劑盒1、用途：檢測犬、貓等哺乳動物血清中的抗狂犬病毒IgG抗體。2、原理：ELISA3、規(guī)格：1×96/盒；4、操作要求：陰性對照、陽性對照、臨界對照、已稀釋樣本≤100ul，設置空白孔，37℃≤30min，洗板；加入酶標抗體溶液≤50ul，37℃≤30min，洗板；加入混合顯色液≤100ul，37℃≤15min。OD450檢測5、結果評價：陰性對照值≤0.15；0.2≤臨界對照值≤0.8；臨界對照/陰性對照≥2.0;陽性對照＞臨界對照；樣品值/臨界對照≥1.0，結果陽性；樣品值/臨界對照＜1.0，結果陰性。6、檢測IgG總抗體，并非僅檢測中和抗體。7、保存條件：2？8℃8、到用戶有效期：≥6個月品目號2-20：動物布魯氏菌單克隆抗體競爭ELISA檢測試劑盒1、用途采用競爭 ELISA 技術，用于檢測光滑型牛、羊布魯氏菌血清抗體，檢測結果可用于布魯氏菌感染的輔助診斷。2、原理：單克隆抗體競爭ELISA。3、樣本要求:牛、羊血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒。5、操作過程及要求樣品≥50μl，加入到抗原包被板中，加入單克隆抗體溶液≥50μl，室溫放置≤45 分鐘。洗板。每孔加 HRP標記山羊抗鼠IgG≥100μl，室溫放置≤45分鐘。洗板，每孔加底物顯色液≥100μl，室溫下避光顯色≤10 分鐘。 每孔加終止液≥50μl，15分鐘內(nèi)用酶標儀測定并記錄各孔在 450nm 波長處的吸光度。6、實驗結果判定抑制率（PI）≥30%判為陽性，抑制率（PI）＜30%判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥6個月。9、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品新獸藥注冊證書及獸藥產(chǎn)品批準文號批件，或相應有效證明。品目號2-21：動物布魯氏菌抗體競爭ELISA檢測試劑盒1、用途：檢測牛、羊血清中的布魯氏菌特異性抗體，用于血清學診斷。2、原理：競爭ELISA3、樣本要求：血清4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2×96/盒5、操作過程及要求：樣品（40倍稀釋）≤50μL，陰性2孔（40倍稀釋）≤50μL，陽性2孔（40倍稀釋）≤50μL，加二抗≤50μL。加抗體工作液≤100μL。37度避光孵育≤30min。洗板。加底物A、B（1:1混合）≤100μL，37度避光孵育≤15min。加終止液≤50μL，450nm檢測。6、實驗結果判定成立條件：陽性對照孔OD均值應＜0.2，陰性對照孔OD均值應＞1.0。結果判定：PI（阻斷率）=100 % -（樣品OD值÷陰性OD均值）×100%。PI≥30 %判為陽性，PI＜30%判為陰性。7、保存條件：2～8℃避光保存8、到用戶手上有效期：≥6個月9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-22：牛布魯氏菌抗體間接ELISA檢測試劑盒1.用途：檢測牛血清中的布魯氏菌特異性抗體，用于牛的血清學診斷。2.原理：間接ELISA3.樣本要求：血清4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：（1）2×96/盒（2）抗原包被板（3）洗滌液10倍稀釋，酶標二抗100倍稀釋，其余試劑為即用試劑。5.操作過程及要求：樣品稀釋液≤50μL，樣品（50倍稀釋）≤50μL，陰性2孔（不稀釋）≤100μL，陽性2孔（不稀釋）≤100μL，室溫避光孵育30min。洗板。加二抗≤100μL。室溫避光孵育30min。洗板。加底物A、B（1:1混合）≤100μL，室溫避光孵育≤10min。加終止液≤50μL，450nm檢測。6.實驗結果判定：（1）成立條件：陰性對照平均OD450nm值＜0.30且陽性對照平均OD450nm值≥1.0。（2）結果判定：S/P=(樣品平均值-NCX)/(PCX-NCX)。S/P＜0.3時，判為陰性；S/P≥0.3時，判為陽性。7.保存條件：2～8℃避光保存8.到用戶手上有效期：≥6個月9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-23：布病試管凝集試驗抗原1、用途：檢測牛、羊、豬、駱駝、馬、鹿、犬布病光滑型抗體2、原理：試管凝集3、規(guī)格和配置：標準抗原150頭份/15ml/瓶，按1:1:1原則(一瓶抗原配一瓶陽性血清和陰性血清）配標準陽性血清（綿羊血清）和標準陰性血清（牛血清）。4、保存條件：2-8℃保存5、樣本要求：血清6、操作過程:比濁對照管配制：1:20稀釋抗原用等量稀釋液稀釋（1:40）后，再用稀釋液配制成含1:40抗原0%、25%、50%、75%、100%的懸液。血清稀釋：被檢血清及陰、陽性對照血清都作12.5、25、50、100、200倍稀釋。將0.5ml1:20稀釋抗原和0.5ml各稀釋度血清在小試管（直徑約1cm）中分別混合，置37℃溫箱中反應24小時后，取出試管，將上清部位與比濁對照管進行濁度比較，讀取濁度結果。7、成立條件:反應試管內(nèi)濁度接近100%1:40抗原濁度，記錄為“—”，表示無反應；接近75%，記錄為“+”，表示有接近25%的反應；接近50%，記錄為“++”，表示有接近50%的反應；接近25%，記錄為“+++”，表示有接近75%的反應；接近0%，記錄為“+++”，表示有接近100%的反應。8、結果判定:牛、鹿、駱駝等大動物血清最終稀釋度（是血清稀釋度的2倍數(shù)）1:100及以上出現(xiàn)“++”反應判定為陽性反應，1:50出現(xiàn)“++”反應判定為可疑反應，否則判為陰性反應。豬、羊、犬等中小動物1:50及以上出現(xiàn)“++”反應判定為陽性反應，1:25出現(xiàn)“++”反應判定為可疑反應，否則判為陰性反應。9、試劑盒要求:稀釋液：0.5%苯酚生理鹽水。抗原稀釋：布氏菌病試管凝集試驗抗原作1:20稀釋使用。主要成分為抗原性良好的滅活布魯氏菌菌體抗原。10、到用戶手上有效期：≥6個月品目號2-24：塞尼卡谷病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒1、用途：檢測豬血清中塞尼卡谷病毒（SVV）抗體2、原理：間接ELISA3、規(guī)格：2×96/盒；4、操作過程：加入≤50μL沒有稀釋的陰陽性性對照，每次檢測加兩孔。在相應的孔中加入≤50μL已稀釋好的樣品。37℃條件下孵育≤30分鐘，洗板，每孔加入≤50μL兔抗豬IgG-HRP工作液，37℃條件下孵育≤30分鐘。每孔加入≤50μL底物溶液。37℃條件下孵育≤12分鐘。每孔加入≤50μL終止液。450nm波長讀取OD值。5、結果評價：PCx-NCx≥0.30且NCx≤0.20時，實驗成立。S/P？0.35抗體陰性，S/P≥0.35抗體陽性。6、產(chǎn)品有效期：≥12個月7、保存條件：2-8℃避光保存8、產(chǎn)品由國家權威機構（即口蹄疫國家參 考實驗室）參與研制。品目號2-25：口蹄疫非結構蛋白3ABC抗體阻斷ELISA試劑盒1、用途：檢測牛羊豬血清中口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC抗體，不區(qū)分病毒血清型。2、原理：阻斷ELISA3、規(guī)格：2×96/盒；4、操作要求：（1）樣本稀釋液≤80uL，被檢樣品、弱陽性、陽性、陰性血清每孔≤20μL；（2）室溫溫育≤1h（牛羊血清），15-25℃孵育≤16-20h（豬血清）；洗板；（3）加入酶標抗體溶液≤100μL/孔，15-25℃孵育≤1h，洗板；（4）加入底物溶液≤100μL/孔，15-25℃孵育10-15min；（5）加入終止液≤100μL/孔；酶標儀讀值（450nm）5、結果評價：陰性對照OD＞1.0；弱陽性PI應大于50%，陽性對照PI應大于70%。PI≥50%，結果為陽性；PI＜50%，結果為陰性。6、保存條件：2-8℃7、到用戶有效期：≥6個月8、產(chǎn)品由國家權威機構（即國家參 考實驗室）參與研制。品目號2-26：口蹄疫非結構蛋白抗體單抗阻斷ELISA試劑盒1、用途：檢測豬、牛、羊及其它動物口蹄疫病毒（FMDV）非結構蛋白抗體的檢測；2、敏感性、特異性均達到96%以上；3、重復性：批內(nèi)及批間差均小于3%；4、試劑盒規(guī)格：1×96/盒；5、保存條件及有效期：2-8℃條件下保存，有效期12個月；6、結果判定（1）試驗結果同時符合下列條件，方為有效：①陰性對照OD450平均值－陽性對照OD450平均值應≥0.6；②陽性對照阻斷率均≥55%；（2）結果判定：豬血清樣品：①被檢樣品Inh%≥30%，判為FMDV-NS抗體陽性；②被檢樣品20%≤Inh%＜30%，判為FMDV-NS抗體可疑 ③被檢樣品Inh%＜20%，判為FMDV-NS抗體陰性。 牛、羊以及其它動物血清樣品：①被檢樣品Inh%≥40%，判為FMDV-NS抗體陽性；②被檢樣品25%≤Inh%＜40%，判為FMDV-NS抗體可疑；③被檢樣品Inh%＜25%，判為FMDV-NS抗體陰性。7、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)應具有獸藥GMP證書（驗收范圍含免疫學類診斷制品生產(chǎn)線生產(chǎn)）或相應有效證明。品目號2-27：口蹄疫A/O型抗體液相阻斷ELISA試劑盒1.試劑用途：適用于牛、羊、豬等偶蹄動物口蹄疫A/O型抗體檢測2.規(guī)格：10×96/盒；3.保存條件：病毒抗原-20℃以下保存，其他組分2-8℃存放。4.樣本要求：血清5.試劑原理：液相阻斷ELISA6.操作過程：（1）被檢樣品、陰陽性血清倍比稀釋，每孔≤50μL；（2）每孔加入病毒抗原≤50μL，其中病原對照孔加入病原抗原≤100μL；37℃溫育≤1.5h；（3）將第一步的液體轉移到包被板，每孔≤50μL；37℃溫育≤60min，洗板；（4）加入抗體溶液≤50μL/孔，37℃溫育≤30min，洗板；（5）加入抗體溶液≤50μL/孔，37℃溫育≤30min，洗板；（6）加入混合顯色液≤50μL/孔，37℃避光溫育≤15min；（7）加入終止液≤50μL/孔；酶標儀讀值（450nm）7.成立條件：病毒抗原對照OD值應在1.0以上；陽性對照抗體效價應在1:1024±1滴度以內(nèi)；陰性對照抗體效價應＜1:8。8.結果判定：抗體效價≥1:128，判為陽性；抗體效價≤1:64，判為陰性；抗體效價在1:64～1:128時，判為可疑。9.到用戶手上有效期：≥4個月10、產(chǎn)品由國家權威機構（即國家參 考實驗室）參與研制。品目號2-28：口蹄疫O型合成肽免疫抗體間接ELISA檢測試劑盒1、用途：檢測豬口蹄疫O型合成肽免疫抗體2、原理：間接ELISA3、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2×96/盒；4、操作過程及要求加入樣品、陰性對照（無須稀釋）、陽性對照（無須稀釋）≤50μL，37℃孵育≤30min。洗板。加抗體溶液≤50μL。37℃孵育≤30min。洗板。加底物工作液≤50μL。37℃孵育≤12min。加終止液≤50uL，450nm檢測。5、實驗結果判定成立條件:PC？x -NC？x≥0.30，NC？x≤0.20 OD450≥0.5，樣品結果為陽性；OD450≤0.5，樣品結果為陰性。6、保存條件：+2℃－+8℃保存7、到用戶手上有效期：≥9個月。品目號2-29：口蹄疫O型/A型單抗競爭固相阻斷ELISA檢測試劑盒1、用途：用于檢測豬、牛、羊等各種動物的口蹄疫O型/A型抗體；2、原理：單抗競爭阻斷型ELISA方法3、規(guī)格：2×96/盒；4、操作時間及過程：約45分鐘；≤20倍稀釋待檢樣品，在反應板上選取4個孔設置為陰/陽性對照孔，分別兩孔中加入≤50μl 陰性對照，另兩孔加入≤50μl 陽性對照；之后將稀釋好的血清樣品從稀釋板中按≤50μl/孔次序轉移至反應板相應孔內(nèi)，立即在所有孔中加入 ≤50μl 酶標單抗，使用微量振蕩器充分混勻，貼上封板膜，37℃ 靜置孵育 ≤30 分鐘。洗板3-5次。將等體積底物 A 溶液和底物 B 溶液混勻，在各孔加入≤50μl 混合液，貼上封板膜，置 37 ℃避光反應≤15 分鐘。各孔加入≤50μl 終止液終止反應，在酶標儀上讀取 OD450nm值；5、實驗有效性分析及結果判定：ODPC＜0.2；ODNC＞0.6；若 S/N 值＜0.4，樣品為口蹄疫O型抗體陰性。若S/N值≥0.4，樣品為口蹄疫O型抗體陽性；6、保存條件：2？8℃保存；7、到用戶手上有效期：≧6個月。8、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)應具有獸藥GMP證書（驗收范圍含免疫學類診斷制品生產(chǎn)線生產(chǎn)）或相應有效證明。品目號2-30：口蹄疫O型/A型單抗競爭ELISA檢測試劑盒1.用途：用于檢測豬、牛、羊等動物血清中 O 型/A 型口蹄疫病毒（FMDV）抗體。2.原理：（1）單抗固相競爭ELISA，既可定性，也可定量。（2）ELISA板包被O型/A型口蹄疫病毒兔源抗血清、捕獲O型/A型口蹄疫病毒滅活抗原；（3）樣品血清和酶標抗體直接混合添加入酶標板；無須再添加酶標二抗操作；3.樣本要求:血清4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：5╳96/盒；5.操作過程及要求（1）稀釋板中被檢樣品、陰陽性血清倍比稀釋，設置空白對照孔；（2）稀釋板液體平移至ELISA版，每孔≤50μL；（3）每孔加入等量酶標抗體工作液；37℃溫育≤30min，洗板；（4）加入底物溶液≤50μL/孔，37℃避光溫育10-15min；（5）加入終止液≤50μL/孔；（6）酶標儀讀值（450nm）；6.實驗結果判定。酶標抗體對照孔OD應0.9-2.5范圍內(nèi)；陽性血清效價應1:1024±1滴度范圍內(nèi)；陰性對照抗體效價應＜1:8。7.結果判定：以酶標抗體對照孔平均OD的60%設置為臨界值?？贵w效價≥1:64，判為陽性；抗體效價≤1:32，判為陰性；介于兩者之間，判為可疑。8.保存條件：+2℃－+8℃保存9.到用戶手上有效期：≥6個月。品目號2-31：口蹄疫O型/A型單克隆抗體競爭ELISA檢測試劑盒1、用途：用于檢測豬血清、牛血清和羊血清中口蹄疫病毒O型/A型抗體。2、原理：單抗固相競爭ELISA。3、樣本要求:豬、牛和羊血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒。5、操作過程及要求樣品和對照品≥50μl，加入酶標抗體（A）≥50μl，置37℃孵育≤60分鐘。洗滌。每孔加入底物溶液≤50μl，置37℃避光孵育≤20分鐘。每孔加入終止液（2mol/L硫酸溶液）≤50μl，450nm下讀取OD450nm值。6、實驗結果判定O型試劑盒：陰性對照血清OD450皿平均值應在L0-2.0范圍內(nèi)，陽性對照血清PI 值＞60,則判為試驗成立。待檢豬血清PI值＞25時，判為陽性，待檢豬血清PI值≤25時，判為陰性；待檢牛血清PI值＞35時，判為陽性，待檢牛血清PI值≤35時，判為陰性；待檢羊血清PI 值＞55時，判為陽性，待檢羊血清PI值≤55時，判為陰性。A型試劑盒：陰性對照血清OD450nm平均值應在1.0-2.0范圍內(nèi)，陽性對照血清PI值＞60，則判為試驗成立。待檢豬血清PI值＞25時，判為陽性，待檢豬血清PI值≤25時，判為陰性；待檢牛血清PI值＞45時，判為陽性，待檢牛血清PI值≤45時，判為陰性；待檢羊血清PI值＞45時，判為陽性，待檢羊血清PI值≤45時，判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。
品目號2-1：（★核心產(chǎn)品）豬瘟病毒抗體阻斷ELISA檢測試劑盒1、用途：適用于檢測豬血清中豬瘟病毒抗體。2、原理：阻斷型或競爭型ELISA3、試劑盒規(guī)格：2╳96/盒；4、操作規(guī)程及要求：總反應時長不多于2.5小時；5、保存條件：2？8℃保存；6、到用戶手上有效期：≧6個月。7、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸醫(yī)局、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心及分中心、中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或所投產(chǎn)品國家參 考實驗室）參與研制；※8、評標時，投標人應提供：包被豬瘟蛋白單克隆抗體的聲明?！?、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品實物1個。※10、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)應具有獸藥GMP證書（驗收范圍含免疫學類診斷制品生產(chǎn)線生產(chǎn)）或相應有效證明?！?1、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品中文使用說明書，其中應有阻斷型（或競爭型）和單抗等表述或等同描述。投標人應在說明書上做特殊標記，以突出顯示，方便評審專家核對。品目號2-2：非洲豬瘟抗體ELISA試劑盒1.用途：檢測非洲豬瘟病毒（ASFV）抗體。 2.原理：ELISA3.樣本要求:血清4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：（1）2×96/盒；（2）洗滌液為20倍濃縮液，其余試劑為即用試劑，不需稀釋。5.操作過程及要求在 A1 和 B1 孔加入 ASFV 陰性血清（III）各≥50μl；在 C1 和 D1 孔加入 ASFV 陽性血清（IV）各≥50μl；剩余孔加入≥50μl 樣品，37℃孵育≤20 分鐘，洗板；每孔加入≥50μl的酶標抗原，37℃孵育≤20 分鐘，洗板；每孔加入≥50μl 底物溶液 A（VII），每孔再加入≥50μl 底物溶液 B（VIII），37℃避光孵育 10-15 分鐘；每孔加入≥50μl 的終止液（IX）終止顯色反應；使用酶標儀測定 450nm 波長處的 OD 值。 6.實驗結果判定(1)試驗成立條件：ODNC值≤0.15 且 ODPC值≥0.6，試驗結果有效；否則重新進行試驗。 (2) 判定：Cut Off 值≤0.15，結果判為陰性；Cut Off 值＞0.15，結果判為陽性。 7.保存條件：+2℃－+8℃保存8.到用戶手上有效期：≥6個月?！?.所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域權威機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-3：牛結核分枝桿菌抗體ELISA檢測試劑盒1.用途：檢測牛血清中分枝桿菌特異性抗體。 2.原理：ELISA3.產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒；；4.操作過程及要求陰性對照、陽性對照、待檢樣本各≤100μl，37℃≤30 分鐘，洗板；加入酶標抗體≤100μl，37℃≤30 分鐘，洗板；底物溶液≤100uL，室溫≤9分鐘；終止液≤100uL，450nm讀數(shù)5.實驗結果判定陽性對照≥0.5；陰性對照＜0.2；S/P≥0.205，結果陽性；S/P＜0.205，結果陰性；6.到客戶手上有效期：≥6個月。7、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心及分中心、中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或所投產(chǎn)品國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-4：馬鼻疽提純鼻疽菌素1、用途：用于診斷馬屬動物的鼻疽病。2、原理：采用變態(tài)反應方法。3、產(chǎn)品規(guī)格及配置：6mg/瓶。4、操作過程及要求4.1點眼法:先將凍干提純鼻疽菌素稀釋成lmg/ml（液體提純菌素用原液）,然后0.3ml滴于（約3？4滴）被檢動物的健康眼結膜囊內(nèi)。分別于3、6、9、24小時檢査反應。4.2皮內(nèi)注射法：在頸中部上皮膚處剪毛（直徑3？10cm）,用游標卡尺測量剪毛處中央皮皺厚度，作好記錄。注射前用75%酒精消毒。將凍干提純鼻疽菌素稀釋成0.5mg/ml，不論大小動物一律皮內(nèi)注射O.lmL注射部位應出現(xiàn)小泡，如有疑問時應另選15cm以外的部位或?qū)戎匦伦⑸洹?、實驗結果判定5.1點眼法:陰性反應（一）：點眼后沒有反應，或結膜輕微充血及流淚?？梢煞磻ㄍ粒貉劢Y膜潮紅，有彌漫性浮腫和灰白色粘液性（非膿性）眼験。弱陽性反應（ + ）：眼結膜發(fā)炎，浮腫明顯，并含有少量的膿性眼豚，或在灰白色粘液性眼豚中混有膿性眼豚。陽性反應（ + + ）：眼瞼浮腫，眼睛呈半開狀態(tài)，出現(xiàn)中等量眼豚。強陽性反應（ + + + ）：眼反應特別明顯，上下眼瞼互相膠著，出現(xiàn)大量膿液。陰性和可疑的馬、驢、騾，經(jīng)過5？6天后重檢。重檢時，在第一次點眼的同一眼睛內(nèi)滴入鼻疽菌素3？4滴。經(jīng)過3、6、9、24小時后，分別按前述標準判定結果。5.2皮內(nèi)注射法：注射后72小時判定，仔細觀察注射部位有無熱痛，腫脹等炎性反應，并用卡尺測量皮皺厚度，作好詳細記錄。判定標準如下：陽性反應（ + ）：局部有明顯的炎性反應，皮皺厚度差N4.0mm。疑似反應（土）：局部的炎性反應不明顯，皮皺厚度差在2.0？4.0mm之間。陰性反應（一）：局部無炎性反應，皮皺厚度差W2.0mm。對于疑似反應動物可與72小時判定后即刻在另一側用同一批菌素同一劑量進行第二次注射，再經(jīng)72小時觀察反應。6、保存條件：8℃以下保存。7、到用戶手上有效期：≥2年。品目號2-5：馬傳染性貧血ELISA檢測試劑盒1、用途用于檢測馬血清中馬傳染性貧血病毒抗體。2、原理：ELISA。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒。5、操作過程及要求樣品≤60μL，陰陽性原液2孔≤60μL，分別加入酶標抗原≤60μL，37℃孵育≤30min。取出包被板，孵育后的樣品每孔≤100μL，37℃孵育≤30min。洗板。加底物溶液≤100μL。室溫避光孵育≤5min。加終止液≤50uL，450nm檢測。6、實驗結果判定(1)成立條件:陽性對照OD450值＜0.20，陰性對照OD450值＞1.0。(2)結果判定:檢測血清樣品抑制率≥55%時，判定為陽性樣品。檢測血清樣品抑制率＜55%時，判定為陰性樣品。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-6：馬傳染性貧血瓊脂擴散實驗標準抗原1、用途：用于瓊脂擴散試驗診斷馬傳染性貧血。2、原理：瓊脂擴散試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求用含0.01%硫柳汞的PBS制備1%瓊脂平板，按六角形打孔，孔徑為5mm，孔距為3mm。中心孔滴加抗原，陽性血清滴加外周2、4孔，6孔加陰性血清，被檢血清滴加1、3、5孔，滴加時以孔滿為度。置15℃？30℃ 72小時，于24、48及72小時各觀察1次。 6、實驗結果判定當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，陰性血清與抗原孔之間無沉淀線，而被檢血清與抗原孔間也有明顯沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔內(nèi)側偏彎時，該被檢血清為陽性。當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，而被檢血清與抗原孔間無沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔直伸或向外偏彎時，該被檢血清為陰性。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-7：馬傳染性貧血瓊脂擴散實驗標準陽性血清1、用途：用于瓊脂擴散試驗診斷馬傳染性貧血。2、原理：瓊脂擴散試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求用含0.01%硫柳汞的PBS制備1%瓊脂平板，按六角形打孔，孔徑為5mm，孔距為3mm。中心孔滴加抗原，陽性血清滴加外周2、4孔，6孔加陰性血清，被檢血清滴加1、3、5孔，滴加時以孔滿為度。置15℃~30℃ 72小時，于24、48及72小時各觀察1次。 6、實驗結果判定當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，陰性血清與抗原孔之間無沉淀線，而被檢血清與抗原孔間也有明顯沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔內(nèi)側偏彎時，該被檢血清為陽性。當陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，而被檢血清與抗原孔間無沉淀線，或陽性血清與抗原孔間的沉淀線末端向毗鄰的被檢血清孔直伸或向外偏彎時，該被檢血清為陰性。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-8：小反芻獸疫抗體競爭ELISA試劑盒1.用途：小反芻獸疫病毒（PPRV）抗體。 2.原理：ELISA3.樣本要求:綿羊、山羊等血清或血漿4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：（1）5×96/盒；；（2）洗滌液為20倍濃縮液，其余試劑為即用試劑，不需稀釋。5.操作過程及要求在 A1 和 B1 孔加入 ASFV 陰性血清（III）各≥50μl；在 C1 和 D1 孔加入 ASFV 陽性血清（IV）各≥50μl；在 E1 和 F1 孔加入樣品稀釋液（II）各≥50μl；剩余孔加入≥25μl樣品稀釋液，然后加入≥25μl樣品；37℃孵育≥60 分鐘，洗板；每孔加入≥50μl的酶標抗體，37℃孵育≥30分鐘，洗板；每孔加入≥50μl底物溶液，室溫下避光孵育15分鐘； 每孔加入≥50μl的終止液終止顯色反應；使用酶標儀測定 450nm 波長處的 OD 值。 6.實驗結果判定(1)試驗成立條件：根據(jù)抑制率判定檢驗結果，PIPC＞60，PINC＜40，試驗結果有效；否則重新進行試驗。(2)判定：PIS＞50，結果為陽性；PIS≤50，結果為陰性。7.保存條件：+2℃－+8℃保存8.到用戶手上有效期：≥6個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局、中國動物衛(wèi)生與流行病學中心及分中心、中國動物疫病預防控制中心、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或所投產(chǎn)品國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-9：禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）血凝抑制試驗標準抗原1、用途：用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔中加入0.025ml血清，將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-10：禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）血凝抑制試驗標準陽性血清1、用途：用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H5（Re-11/Re-12）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔中加入0.025ml血清，將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-11：禽流感病毒H7（Re-2）血凝抑制試驗標準抗原1、用途：用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H7（Re-2）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔加入0.025ml血清，在反應板上將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-12：禽流感病毒H7（Re-2）血凝抑制試驗標準陽性血清1、用途:用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒H7（Re-2）亞型抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔加入0.025ml血清，血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-13：禽流感病毒血凝抑制試驗標準陰性血清1、用途:用于血凝抑制（HI）試驗檢測禽流感病毒抗體。2、原理：血凝抑制（HI）試驗。3、樣本要求:血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求（1）根據(jù)HA測定的效價，計算配制4個血凝單位（4HAU）抗原。（2）在第1孔至第11孔中每孔加入0.025ml PBS；在第12孔中加入0.05ml PBS。（3）第1孔中加入0.025ml血清，將血清橫向0.025ml的對倍稀釋至第10孔。（4）在第1孔至第11孔中，每孔加入0.025ml的4 HAU抗原，室溫下（20～25℃）靜置30分鐘或2～8℃ 45～60分鐘。（5）每孔加入0.025ml 1%（V/V）雞紅細胞懸液，輕晃混勻后，室溫（20～25℃）靜置20～40分鐘或2～8℃ 45～60分鐘，當對照孔的紅細胞顯著成紐扣狀時判定結果。 6、實驗結果判定以完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。7、保存條件：-20℃以下保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-14：禽白血病AB亞型抗體ELISA檢測試劑盒1、用途:用于檢測雞血清中禽白血病病毒AB亞群抗體。2、原理：ELISA。3、樣本要求:雞血清。4、產(chǎn)品規(guī)格：5×96/盒。5、操作過程及要求樣品及對照品≥100μl/孔，在 37℃下孵育≤30分鐘。洗滌。加入酶標抗體≥100μl/孔，置37℃溫箱孵育≤30分鐘。洗滌，加入底物溶液≥100μl/孔，置室溫（15~25℃）避光孵育≤15分鐘。加入終止液≥100μl/孔，450nm下讀取OD450nm值。6、實驗結果判定0.6＜陽性對照血清OD450nm值均≤1.3，陰性對照血清OD450nm值均＜0.10，試驗方可成立。待檢樣品S/P值≥0.2時，判為陽性；待檢樣品S/P值＜0.2時，判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-15：禽白血病病毒J型抗體ELISA檢測試劑盒1、用途:用于檢測雞血清中禽白血病病毒J亞群抗體。2、原理：ELISA。3、樣本要求:雞血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：5×96/盒。5、操作過程及要求樣品及對照品≥100μl/孔，在 37℃下孵育≤30分鐘。洗滌。加入酶標抗體≥100μl/孔，置37℃溫箱孵育≤30分鐘。洗滌，加入底物溶液≥100μl/孔，置室溫（15~25℃）避光孵育≤15分鐘。加入終止液≥100μl/孔，450nm下讀取OD450nm值。6、實驗結果判定 0.55＜陽性對照血清OD450nm值均≤1.25，陰性對照血清OD450nm值均＜0.10，試驗方可成立。判定，待檢樣品S/P值≥0.3時，判為陽性；待檢樣品S/P值＜0.3時，判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-16：禽白血病病毒P27抗原ELISA檢測試劑盒1、用途用于檢測蛋清、泄殖腔拭子、病毒培養(yǎng)液等樣品中禽白血病病毒 p27 蛋白，檢測結果可用于 ALV 感染的輔助診斷。2、原理：ELISA。3、樣本要求:蛋清、泄殖腔拭子、病毒培養(yǎng)液等樣品。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：5×96/盒。5、操作過程及要求樣品及對照品≥100μl/孔，在 37℃下孵育≤30分鐘。洗滌。加入酶標抗體≥100μl/孔，置37℃溫箱孵育≤1小時。洗滌，加入酶標抗體≤100μl/孔，在 37℃下孵育≤1小時。 洗滌，加入底物溶液 A≤50μl/孔；加入底物溶液 B≤50μl/孔，在室溫（15~25℃）下，避光孵育≤15分鐘。加入終止液≤50μl/孔，630nm 的波長下讀數(shù)。6、實驗結果判定陽性對照品孔的平均 OD630nm 值＞0.20，陰性對照品孔的平均 OD630nm 值＜0.10。 檢測樣品 S/P 值≥0.2 時，判定為陽性樣品；檢測樣品 S/P 值＜0.2 時，判定為陰性樣品。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥9個月。品目號2-17：雞白痢平板凝集實驗標準抗原1、用途：用于全血平板凝集試驗診斷雞白痢、雞傷寒。2、原理：采用平板凝集方法。3、樣本要求:血液。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：15毫升/瓶。5、操作過程及要求用滴管吸取抗原，垂直滴于玻板上l滴（相當于0.05ml），然后用針頭刺破雞的肱靜脈或冠尖，取血0.05ml（相當于內(nèi)徑7.5～8.0mm金屬絲環(huán)的2滿環(huán)血液），與抗原混合均勻，并涂散成直徑約2.0cm的液面，2分鐘內(nèi)判定結果。6、實驗結果判定發(fā)生50%(++)以上凝集，為陽性；不發(fā)生凝集，為陰性；界于上述兩者之間，為可疑。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-18：雞白痢平板凝集實驗標準血清1、用途：用于全血平板凝集試驗診斷雞白痢、雞傷寒。2、原理：采用平板凝集方法。3、樣本要求:血液。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2毫升/瓶。5、操作過程及要求用滴管吸取抗原，垂直滴于玻板上l滴（相當于0.05ml），然后用針頭刺破雞的肱靜脈或冠尖，取血0.05ml（相當于內(nèi)徑7.5～8.0mm金屬絲環(huán)的2滿環(huán)血液），與抗原混合均勻，并涂散成直徑約2.0cm的液面，2分鐘內(nèi)判定結果。6、實驗結果判定發(fā)生50%(++)以上凝集，為陽性；不發(fā)生凝集，為陰性；界于上述兩者之間，為可疑。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。品目號2-19：狂犬病抗體ELISA試劑盒1、用途：檢測犬、貓等哺乳動物血清中的抗狂犬病毒IgG抗體。2、原理：ELISA3、規(guī)格：1×96/盒；4、操作要求：陰性對照、陽性對照、臨界對照、已稀釋樣本≤100ul，設置空白孔，37℃≤30min，洗板；加入酶標抗體溶液≤50ul，37℃≤30min，洗板；加入混合顯色液≤100ul，37℃≤15min。OD450檢測5、結果評價：陰性對照值≤0.15；0.2≤臨界對照值≤0.8；臨界對照/陰性對照≥2.0;陽性對照＞臨界對照；樣品值/臨界對照≥1.0，結果陽性；樣品值/臨界對照＜1.0，結果陰性。6、檢測IgG總抗體，并非僅檢測中和抗體。7、保存條件：2？8℃8、到用戶有效期：≥6個月品目號2-20：動物布魯氏菌單克隆抗體競爭ELISA檢測試劑盒1、用途采用競爭 ELISA 技術，用于檢測光滑型牛、羊布魯氏菌血清抗體，檢測結果可用于布魯氏菌感染的輔助診斷。2、原理：單克隆抗體競爭ELISA。3、樣本要求:牛、羊血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒。5、操作過程及要求樣品≥50μl，加入到抗原包被板中，加入單克隆抗體溶液≥50μl，室溫放置≤45 分鐘。洗板。每孔加 HRP標記山羊抗鼠IgG≥100μl，室溫放置≤45分鐘。洗板，每孔加底物顯色液≥100μl，室溫下避光顯色≤10 分鐘。 每孔加終止液≥50μl，15分鐘內(nèi)用酶標儀測定并記錄各孔在 450nm 波長處的吸光度。6、實驗結果判定抑制率（PI）≥30%判為陽性，抑制率（PI）＜30%判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥6個月。9、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品新獸藥注冊證書及獸藥產(chǎn)品批準文號批件，或相應有效證明。品目號2-21：動物布魯氏菌抗體競爭ELISA檢測試劑盒1、用途：檢測牛、羊血清中的布魯氏菌特異性抗體，用于血清學診斷。2、原理：競爭ELISA3、樣本要求：血清4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2×96/盒5、操作過程及要求：樣品（40倍稀釋）≤50μL，陰性2孔（40倍稀釋）≤50μL，陽性2孔（40倍稀釋）≤50μL，加二抗≤50μL。加抗體工作液≤100μL。37度避光孵育≤30min。洗板。加底物A、B（1:1混合）≤100μL，37度避光孵育≤15min。加終止液≤50μL，450nm檢測。6、實驗結果判定成立條件：陽性對照孔OD均值應＜0.2，陰性對照孔OD均值應＞1.0。結果判定：PI（阻斷率）=100 % -（樣品OD值÷陰性OD均值）×100%。PI≥30 %判為陽性，PI＜30%判為陰性。7、保存條件：2～8℃避光保存8、到用戶手上有效期：≥6個月9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-22：牛布魯氏菌抗體間接ELISA檢測試劑盒1.用途：檢測牛血清中的布魯氏菌特異性抗體，用于牛的血清學診斷。2.原理：間接ELISA3.樣本要求：血清4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：（1）2×96/盒（2）抗原包被板（3）洗滌液10倍稀釋，酶標二抗100倍稀釋，其余試劑為即用試劑。5.操作過程及要求：樣品稀釋液≤50μL，樣品（50倍稀釋）≤50μL，陰性2孔（不稀釋）≤100μL，陽性2孔（不稀釋）≤100μL，室溫避光孵育30min。洗板。加二抗≤100μL。室溫避光孵育30min。洗板。加底物A、B（1:1混合）≤100μL，室溫避光孵育≤10min。加終止液≤50μL，450nm檢測。6.實驗結果判定：（1）成立條件：陰性對照平均OD450nm值＜0.30且陽性對照平均OD450nm值≥1.0。（2）結果判定：S/P=(樣品平均值-NCX)/(PCX-NCX)。S/P＜0.3時，判為陰性；S/P≥0.3時，判為陽性。7.保存條件：2～8℃避光保存8.到用戶手上有效期：≥6個月9、所投產(chǎn)品由國家級獸醫(yī)領域科研機構（國家參 考實驗室）參與研制；品目號2-23：布病試管凝集試驗抗原1、用途：檢測牛、羊、豬、駱駝、馬、鹿、犬布病光滑型抗體2、原理：試管凝集3、規(guī)格和配置：標準抗原150頭份/15ml/瓶，按1:1:1原則(一瓶抗原配一瓶陽性血清和陰性血清）配標準陽性血清（綿羊血清）和標準陰性血清（牛血清）。4、保存條件：2-8℃保存5、樣本要求：血清6、操作過程:比濁對照管配制：1:20稀釋抗原用等量稀釋液稀釋（1:40）后，再用稀釋液配制成含1:40抗原0%、25%、50%、75%、100%的懸液。血清稀釋：被檢血清及陰、陽性對照血清都作12.5、25、50、100、200倍稀釋。將0.5ml1:20稀釋抗原和0.5ml各稀釋度血清在小試管（直徑約1cm）中分別混合，置37℃溫箱中反應24小時后，取出試管，將上清部位與比濁對照管進行濁度比較，讀取濁度結果。7、成立條件:反應試管內(nèi)濁度接近100%1:40抗原濁度，記錄為“—”，表示無反應；接近75%，記錄為“+”，表示有接近25%的反應；接近50%，記錄為“++”，表示有接近50%的反應；接近25%，記錄為“+++”，表示有接近75%的反應；接近0%，記錄為“+++”，表示有接近100%的反應。8、結果判定:牛、鹿、駱駝等大動物血清最終稀釋度（是血清稀釋度的2倍數(shù)）1:100及以上出現(xiàn)“++”反應判定為陽性反應，1:50出現(xiàn)“++”反應判定為可疑反應，否則判為陰性反應。豬、羊、犬等中小動物1:50及以上出現(xiàn)“++”反應判定為陽性反應，1:25出現(xiàn)“++”反應判定為可疑反應，否則判為陰性反應。9、試劑盒要求:稀釋液：0.5%苯酚生理鹽水。抗原稀釋：布氏菌病試管凝集試驗抗原作1:20稀釋使用。主要成分為抗原性良好的滅活布魯氏菌菌體抗原。10、到用戶手上有效期：≥6個月品目號2-24：塞尼卡谷病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒1、用途：檢測豬血清中塞尼卡谷病毒（SVV）抗體2、原理：間接ELISA3、規(guī)格：2×96/盒；4、操作過程：加入≤50μL沒有稀釋的陰陽性性對照，每次檢測加兩孔。在相應的孔中加入≤50μL已稀釋好的樣品。37℃條件下孵育≤30分鐘，洗板，每孔加入≤50μL兔抗豬IgG-HRP工作液，37℃條件下孵育≤30分鐘。每孔加入≤50μL底物溶液。37℃條件下孵育≤12分鐘。每孔加入≤50μL終止液。450nm波長讀取OD值。5、結果評價：PCx-NCx≥0.30且NCx≤0.20時，實驗成立。S/P？0.35抗體陰性，S/P≥0.35抗體陽性。6、產(chǎn)品有效期：≥12個月7、保存條件：2-8℃避光保存8、產(chǎn)品由國家權威機構（即口蹄疫國家參 考實驗室）參與研制。品目號2-25：口蹄疫非結構蛋白3ABC抗體阻斷ELISA試劑盒1、用途：檢測牛羊豬血清中口蹄疫病毒非結構蛋白3ABC抗體，不區(qū)分病毒血清型。2、原理：阻斷ELISA3、規(guī)格：2×96/盒；4、操作要求：（1）樣本稀釋液≤80uL，被檢樣品、弱陽性、陽性、陰性血清每孔≤20μL；（2）室溫溫育≤1h（牛羊血清），15-25℃孵育≤16-20h（豬血清）；洗板；（3）加入酶標抗體溶液≤100μL/孔，15-25℃孵育≤1h，洗板；（4）加入底物溶液≤100μL/孔，15-25℃孵育10-15min；（5）加入終止液≤100μL/孔；酶標儀讀值（450nm）5、結果評價：陰性對照OD＞1.0；弱陽性PI應大于50%，陽性對照PI應大于70%。PI≥50%，結果為陽性；PI＜50%，結果為陰性。6、保存條件：2-8℃7、到用戶有效期：≥6個月8、產(chǎn)品由國家權威機構（即國家參 考實驗室）參與研制。品目號2-26：口蹄疫非結構蛋白抗體單抗阻斷ELISA試劑盒1、用途：檢測豬、牛、羊及其它動物口蹄疫病毒（FMDV）非結構蛋白抗體的檢測；2、敏感性、特異性均達到96%以上；3、重復性：批內(nèi)及批間差均小于3%；4、試劑盒規(guī)格：1×96/盒；5、保存條件及有效期：2-8℃條件下保存，有效期12個月；6、結果判定（1）試驗結果同時符合下列條件，方為有效：①陰性對照OD450平均值－陽性對照OD450平均值應≥0.6；②陽性對照阻斷率均≥55%；（2）結果判定：豬血清樣品：①被檢樣品Inh%≥30%，判為FMDV-NS抗體陽性；②被檢樣品20%≤Inh%＜30%，判為FMDV-NS抗體可疑 ③被檢樣品Inh%＜20%，判為FMDV-NS抗體陰性。 牛、羊以及其它動物血清樣品：①被檢樣品Inh%≥40%，判為FMDV-NS抗體陽性；②被檢樣品25%≤Inh%＜40%，判為FMDV-NS抗體可疑；③被檢樣品Inh%＜25%，判為FMDV-NS抗體陰性。7、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)應具有獸藥GMP證書（驗收范圍含免疫學類診斷制品生產(chǎn)線生產(chǎn)）或相應有效證明。品目號2-27：口蹄疫A/O型抗體液相阻斷ELISA試劑盒1.試劑用途：適用于牛、羊、豬等偶蹄動物口蹄疫A/O型抗體檢測2.規(guī)格：10×96/盒；3.保存條件：病毒抗原-20℃以下保存，其他組分2-8℃存放。4.樣本要求：血清5.試劑原理：液相阻斷ELISA6.操作過程：（1）被檢樣品、陰陽性血清倍比稀釋，每孔≤50μL；（2）每孔加入病毒抗原≤50μL，其中病原對照孔加入病原抗原≤100μL；37℃溫育≤1.5h；（3）將第一步的液體轉移到包被板，每孔≤50μL；37℃溫育≤60min，洗板；（4）加入抗體溶液≤50μL/孔，37℃溫育≤30min，洗板；（5）加入抗體溶液≤50μL/孔，37℃溫育≤30min，洗板；（6）加入混合顯色液≤50μL/孔，37℃避光溫育≤15min；（7）加入終止液≤50μL/孔；酶標儀讀值（450nm）7.成立條件：病毒抗原對照OD值應在1.0以上；陽性對照抗體效價應在1:1024±1滴度以內(nèi)；陰性對照抗體效價應＜1:8。8.結果判定：抗體效價≥1:128，判為陽性；抗體效價≤1:64，判為陰性；抗體效價在1:64～1:128時，判為可疑。9.到用戶手上有效期：≥4個月10、產(chǎn)品由國家權威機構（即國家參 考實驗室）參與研制。品目號2-28：口蹄疫O型合成肽免疫抗體間接ELISA檢測試劑盒1、用途：檢測豬口蹄疫O型合成肽免疫抗體2、原理：間接ELISA3、產(chǎn)品規(guī)格及配置：2×96/盒；4、操作過程及要求加入樣品、陰性對照（無須稀釋）、陽性對照（無須稀釋）≤50μL，37℃孵育≤30min。洗板。加抗體溶液≤50μL。37℃孵育≤30min。洗板。加底物工作液≤50μL。37℃孵育≤12min。加終止液≤50uL，450nm檢測。5、實驗結果判定成立條件:PC？x -NC？x≥0.30，NC？x≤0.20 OD450≥0.5，樣品結果為陽性；OD450≤0.5，樣品結果為陰性。6、保存條件：+2℃－+8℃保存7、到用戶手上有效期：≥9個月。品目號2-29：口蹄疫O型/A型單抗競爭固相阻斷ELISA檢測試劑盒1、用途：用于檢測豬、牛、羊等各種動物的口蹄疫O型/A型抗體；2、原理：單抗競爭阻斷型ELISA方法3、規(guī)格：2×96/盒；4、操作時間及過程：約45分鐘；≤20倍稀釋待檢樣品，在反應板上選取4個孔設置為陰/陽性對照孔，分別兩孔中加入≤50μl 陰性對照，另兩孔加入≤50μl 陽性對照；之后將稀釋好的血清樣品從稀釋板中按≤50μl/孔次序轉移至反應板相應孔內(nèi)，立即在所有孔中加入 ≤50μl 酶標單抗，使用微量振蕩器充分混勻，貼上封板膜，37℃ 靜置孵育 ≤30 分鐘。洗板3-5次。將等體積底物 A 溶液和底物 B 溶液混勻，在各孔加入≤50μl 混合液，貼上封板膜，置 37 ℃避光反應≤15 分鐘。各孔加入≤50μl 終止液終止反應，在酶標儀上讀取 OD450nm值；5、實驗有效性分析及結果判定：ODPC＜0.2；ODNC＞0.6；若 S/N 值＜0.4，樣品為口蹄疫O型抗體陰性。若S/N值≥0.4，樣品為口蹄疫O型抗體陽性；6、保存條件：2？8℃保存；7、到用戶手上有效期：≧6個月。8、評標時，投標人應提供：所投產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)應具有獸藥GMP證書（驗收范圍含免疫學類診斷制品生產(chǎn)線生產(chǎn)）或相應有效證明。品目號2-30：口蹄疫O型/A型單抗競爭ELISA檢測試劑盒1.用途：用于檢測豬、牛、羊等動物血清中 O 型/A 型口蹄疫病毒（FMDV）抗體。2.原理：（1）單抗固相競爭ELISA，既可定性，也可定量。（2）ELISA板包被O型/A型口蹄疫病毒兔源抗血清、捕獲O型/A型口蹄疫病毒滅活抗原；（3）樣品血清和酶標抗體直接混合添加入酶標板；無須再添加酶標二抗操作；3.樣本要求:血清4.產(chǎn)品規(guī)格及配置：5╳96/盒；5.操作過程及要求（1）稀釋板中被檢樣品、陰陽性血清倍比稀釋，設置空白對照孔；（2）稀釋板液體平移至ELISA版，每孔≤50μL；（3）每孔加入等量酶標抗體工作液；37℃溫育≤30min，洗板；（4）加入底物溶液≤50μL/孔，37℃避光溫育10-15min；（5）加入終止液≤50μL/孔；（6）酶標儀讀值（450nm）；6.實驗結果判定。酶標抗體對照孔OD應0.9-2.5范圍內(nèi)；陽性血清效價應1:1024±1滴度范圍內(nèi)；陰性對照抗體效價應＜1:8。7.結果判定：以酶標抗體對照孔平均OD的60%設置為臨界值?？贵w效價≥1:64，判為陽性；抗體效價≤1:32，判為陰性；介于兩者之間，判為可疑。8.保存條件：+2℃－+8℃保存9.到用戶手上有效期：≥6個月。品目號2-31：口蹄疫O型/A型單克隆抗體競爭ELISA檢測試劑盒1、用途：用于檢測豬血清、牛血清和羊血清中口蹄疫病毒O型/A型抗體。2、原理：單抗固相競爭ELISA。3、樣本要求:豬、牛和羊血清。4、產(chǎn)品規(guī)格及配置：1×96/盒。5、操作過程及要求樣品和對照品≥50μl，加入酶標抗體（A）≥50μl，置37℃孵育≤60分鐘。洗滌。每孔加入底物溶液≤50μl，置37℃避光孵育≤20分鐘。每孔加入終止液（2mol/L硫酸溶液）≤50μl，450nm下讀取OD450nm值。6、實驗結果判定O型試劑盒：陰性對照血清OD450皿平均值應在L0-2.0范圍內(nèi)，陽性對照血清PI 值＞60,則判為試驗成立。待檢豬血清PI值＞25時，判為陽性，待檢豬血清PI值≤25時，判為陰性；待檢牛血清PI值＞35時，判為陽性，待檢牛血清PI值≤35時，判為陰性；待檢羊血清PI 值＞55時，判為陽性，待檢羊血清PI值≤55時，判為陰性。A型試劑盒：陰性對照血清OD450nm平均值應在1.0-2.0范圍內(nèi)，陽性對照血清PI值＞60，則判為試驗成立。待檢豬血清PI值＞25時，判為陽性，待檢豬血清PI值≤25時，判為陰性；待檢牛血清PI值＞45時，判為陽性，待檢牛血清PI值≤45時，判為陰性；待檢羊血清PI值＞45時，判為陽性，待檢羊血清PI值≤45時，判為陰性。7、保存條件：+2℃－+8℃保存。8、到用戶手上有效期：≥12個月。
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